細(xì)胞培養(yǎng)的規(guī)?？纱罂尚?，你既可以使用生物反應(yīng)器，也可以使用培養(yǎng)瓶或多孔板。如今，利用多孔板的細(xì)胞培養(yǎng)模式正倍受青睞，因?yàn)檫@有助于研究多個(gè)動(dòng)態(tài)變量，減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間，并節(jié)約昂貴的試劑。除了標(biāo)準(zhǔn)的高通量微孔板，還有一些特殊的微孔板被開發(fā)出來，助力3D和器官型細(xì)胞培養(yǎng)。市場上的
細(xì)胞培養(yǎng)板可不少，如何選擇合適的呢？我們需要重點(diǎn)考慮孔的數(shù)量、孔的形狀、微孔板顏色以及表面處理。
1. 孔的數(shù)量
大多數(shù)用戶在組織培養(yǎng)瓶上開始組織培養(yǎng)。不過，許多應(yīng)用也需要多孔板。理想的數(shù)量嘛，取決于你所需的通量水平，以及是否有機(jī)器人的協(xié)助。*手動(dòng)地向96孔板中添加試劑，這并非不可行，但有電動(dòng)移液器或機(jī)器人的幫助當(dāng)然更好。擴(kuò)展到384孔板，就更加需要機(jī)器人，而1536孔板更是絕對需要。當(dāng)然，高密度多孔板的挑戰(zhàn)還在于分析小型化。
2. 孔的形狀
孔的底部可以選擇平的、圓的，或錐形的，這取決于細(xì)胞類型和下游應(yīng)用。對于傳統(tǒng)的2D細(xì)胞培養(yǎng)(如HeLa或MDCK細(xì)胞)，特別是需要對培養(yǎng)物進(jìn)行成像或分光光度測定，通常平底(F-bottom)。細(xì)胞培養(yǎng)板對于不存在接觸抑制的細(xì)胞，弧形底(C-bottom)也不錯(cuò)。圓底(U-bottom)適合懸浮培養(yǎng)(如球體細(xì)胞培養(yǎng))，因?yàn)閳A的表面讓細(xì)胞難以附著和生長。而錐形底很少用于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，但在細(xì)胞沉淀時(shí)可能有用。
3. 微孔板的顏色
多孔板的顏色也與應(yīng)用息息相關(guān)。如果用相差顯微鏡或肉眼觀察細(xì)胞，可選擇透明的多孔板。不過，對于可見光光譜以外的應(yīng)用(如冷光或熒光)，有顏色的多孔板(如白色或黑色)則是必需的。在使用從頂部讀數(shù)的儀器時(shí)，底部應(yīng)該是不透明的，而使用顯微鏡或底部讀數(shù)的儀器時(shí)，應(yīng)選擇底部透明的多孔板。冷光樣品通常選擇白色表面，以便最大限度提高信號的反射率，而大于300 nm的熒光應(yīng)用通常使用黑色表面，以吸收激發(fā)信號。有顏色的表面還可以防止相鄰孔之間的信號串?dāng)_。
4. 表面處理
選擇哪種細(xì)胞表面處理，這要取決于你培養(yǎng)的是懸浮細(xì)胞還是貼壁細(xì)胞。對于懸浮或球體細(xì)胞培養(yǎng)，建議使用BRAND inertGrade微孔板，它經(jīng)過專門的疏水凝膠處理，可抑制細(xì)胞或蛋白附著。對于輕松附著的貼壁細(xì)胞(如HeLa)，標(biāo)準(zhǔn)的組織培養(yǎng)表面就足夠了。對于那些貼壁有困難的細(xì)胞(如原代細(xì)胞)，或涉及到嚴(yán)格洗滌的應(yīng)用，建議使用BRAND的cellGrade微孔板。這種*的表面與多聚賴氨酸處理的表面相似，但它不是涂層，而是塑料性質(zhì)的物理變化，因此不需要冷藏。對于那些敏感細(xì)胞或血清量減少的細(xì)胞，建議使用cellGrade plus表面。
最后，當(dāng)然不能忽視培養(yǎng)容器的質(zhì)量。這不僅僅指細(xì)胞培養(yǎng)板，還包括與細(xì)胞接觸的一切，比如吸頭，以避免細(xì)胞污染或死亡。
